Termékek

A Lamin-A nukleáris fehérje mutáns formájának, a Progerinnek (PG) vagy Lamin AΔ50-nek nevezett nukleáris felhalmozódása Hutchinson-Gilford Progeria szindrómában (HGPS) vagy Progeriaban, egy felgyorsult öregedési betegségben fordul elő.Ennek a genetikai rendellenességnek az egyik fő tünete a bőr alatti zsír elvesztése drámai lipodystrophia következtében. Stabilan indukáltuk a humán PG és a GFP (Green Fluorescent Protein) expresszióját kontrollként a 3T3L1 sejtekben lentivírus rendszer segítségével a A PG expresszió hatása ennek a sejtvonalnak a differenciálódási képességére, amely az egyik leggyakrabban használt adipogén modell.Kvantitatív proteomikát (iTRAQ) végeztünk a PG-felhalmozódás hatásának vizsgálatára.A modulált fehérjék közül néhányat immunoblottal és valós idejű PCR-rel validáltak.A mitokondriális funkciót a) a mitokondriális alapaktivitás, b) a szuperoxid aniontermelés és c) a légzőlánc különböző komplexeinek egyéni hatékonyságának mérésével elemeztük. Megállapítottuk, hogy a PG túlzott expressziója a lentivírus génszállítás által a proliferációs sebesség csökkenése és az adipogén kapacitás hibái a kontrollhoz képest.A kvantitatív proteomikai analízis 181 fehérjét mutatott ki szignifikánsan (p<0,05) a PG-t expresszáló preadipocitákban.A PG-t expresszáló sejtekben a mitokondriális funkció károsodott.Pontosabban, az I komplex aktivitásának növekedését és a szuperoxid-anion túltermelését észleltük.A Reactive Oxygen Species (ROS) megkötő szerekkel való inkubálás az autofág proteolízis csökkenéséhez vezet, amint azt az LC3-II/LC3-I arány is mutatja. A PG expressziója a 3T3L1 sejtekben elősegíti a változásokat számos biológiai folyamatban, beleértve a citoszkeleton szerkezetét, a lipid metabolizmust, a kalciumot. szabályozás, transzláció, fehérje hajtogatás és energiatermelés a mitokondriumok által.Adataink megerősítik a ROS-felhalmozódás hozzájárulását a korai öregedés fenotípusához, és kapcsolatot teremtenek a mitokondriális diszfunkció és a proteosztázis elvesztése között a HGPS-ben.