Termékek

A CTP:foszfokolin-citidil-transzferáz α (CCTα) egy nukleáris enzim, amely katalizálja a sebességkorlátozó lépést a foszfatidilkolin (PC) szintéziséhez szükséges CDP-kolin útvonalban.A CCTα lipidaktivációja a nukleáris burokba való transzlokációját és a nukleoplazmatikus retikulumnak (NR) nevezett intranukleáris membránhálózat kiterjesztését eredményezi egy membrán deformációval járó mechanizmus révén.A nukleáris laminákra is szükség van az NR stabilitásához és proliferációjához, de nem ismert, hogy ez az egyedi szerkezet, vagy általában a nukleáris lamina szükséges-e a PC-szintézishez.Ennek az összefüggésnek a vizsgálatához a nukleáris laminát kimerítette az RNSi, vagy megzavarta a Hutchinson-Gilford progéria szindróma (HGPS) mutáns laminált A (progerin) expressziója, és elemezték a CCTα-ra és a kolin metabolizmusára gyakorolt ​​hatást.A lamin A/C vagy lamin B1 siRNS által közvetített elnémítása CHO sejtekben az NR csökkentésére nem volt hatással a PC szintézisre, míg a kettős knockdown nem specifikusan gátolta az utat.Megerősítve a PC-szintézisben betöltött csekély szerepét, az NR-ben csak 10%-ban volt kimutatható átmenetileg túlzottan túlzott kolin/etanol-amin-foszfotranszferáz.A CHO sejtekben a CCTα nukleoplazmás volt, és a GFP-progerinnel együtt lokalizálódott a nukleáris redőkben és invaginációkban;azonban a HGPS fibroblasztok a CCTα abnormális eloszlását mutatták a citoplazmában és a nukleáris burokban, amit a PC-szintézis kétszeres csökkenése kísért.A megváltozott lokalizáció ellenére a kolin-jelölési kísérletek azt mutatták, hogy a CCT aktivitása nem változott, és a PC-szintézis gátlása egy hemicolinium-érzékeny kolintranszporter csökkent aktivitására vezethető vissza.Arra a következtetésre jutottunk, hogy a CCTα és a laminok kifejezetten együttműködnek az NR kialakításában, de a nukleáris burok általános szerkezete minimális hatással van a CCT aktivitására és a PC szintézisére.