X-GAL CAS:7240-90-6 98% fehértől törtfehérig terjedő kristályos por
| Katalógus szám | XD90008 |
| termék név | X-Gal (5-bróm-4-klór-3-indolil-béta-D-galaktopiranozid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekuláris képlet | C14H15BrClNO6 |
| Molekuláris tömeg | 408,63 |
| Tárolási részletek | -2 és -6 °C között |
| Harmonizált Vámkódex | 29400000 |
Termékleírás
| A megoldás megjelenése | Tiszta, színtelen vagy világossárga oldat (50 mg/ml DMF:MeOH, 1:1) |
| Fajlagos optikai forgatás | -61,5 +/- 1 |
| Kinézet | Fehér vagy törtfehér kristályos por |
| Tisztaság HPLC | min 99% |
| Oldhatóság (5 % DMF-ben) | Oldható (5% w/v, DMF) |
| Víz KF | max 1% |
| Vizsgálat (HPLC vízmentes bázison) | min 98 tömeg% |
Az X-gal felhasználása
Az X-gal (más néven BCIG, 5-bróm-4-klór-3-indolil-β-D-galaktopiranozid) egy szerves vegyület, amely szubsztituált indolhoz kapcsolt galaktózból áll.A vegyületet Jerome Horwitz és munkatársai 1964-ben szintetizálták. A formális kémiai nevet gyakran kevésbé pontos, de kevésbé körülményes kifejezésekre is rövidítik, mint például a bróm-klór-indoxil-galaktozid.Az indoxilból származó X lehet az X forrása az X-gal összehúzódásban.Az X-gal-t gyakran használják a molekuláris biológiában egy enzim, a β-galaktozidáz jelenlétének tesztelésére szokásos célpontja, a β-galaktozid helyett.Ezen enzim aktivitásának kimutatására is használják hisztokémiában és bakteriológiában.Az X-gal egyike a sok indoxil-glikozidnak és észternek, amelyek enzimkatalizált hidrolízis eredményeként az indigófestékhez hasonló oldhatatlan kék vegyületeket eredményeznek.
Az X-gal a laktóz analógja, ezért a β-galaktozidáz enzim hidrolizálhatja, amely a D-laktóz β-glikozidos kötését hasítja.Az X-gal β-galaktozidázzal hasítva galaktózt és 1-es 5-bróm-4-klór-3-hidroxi-indolt eredményez. Ez utóbbi spontán dimerizálódik, és 5,5'-dibróm-4,4'-diklórrá oxidálódik. -indigo - 2, intenzív kék színű termék, amely oldhatatlan.Az X-gal maga színtelen, ezért a kék színű termék jelenléte felhasználható az aktív β-galaktozidáz jelenlétének vizsgálatára.Ez azt is lehetővé teszi, hogy a bakteriális β-galaktozidázt (úgynevezett lacZ-t) riporterként használják különféle alkalmazásokban.
A kéthibrid elemzésben a β-galaktozidáz használható riporterként az egymással kölcsönhatásba lépő fehérjék azonosítására.Ebben a módszerben a genomkönyvtárakat szűrhetjük fehérje-kölcsönhatásra élesztőgomba vagy bakteriális rendszer segítségével.Ahol sikeres kölcsönhatás lép fel a szkrínelt fehérjék között, az egy aktivációs domén promóterhez való kötődését eredményezi.Ha a promoter egy lacZ génhez kapcsolódik, a β-galaktozidáz termelése, amely X-gal jelenlétében kék-pigmentált telepek kialakulását eredményezi, a fehérjék közötti sikeres kölcsönhatást jelzi.Ez a technika a körülbelül 106-nál kisebb méretű könyvtárak szűrésére korlátozódhat. Az X-gal sikeres hasítása az indol elpárolgása miatt is észrevehetően kellemetlen szagot hoz létre.
Mivel maga az X-gal színtelen, a kék színű termék jelenléte használható az aktív β-galaktozidáz jelenlétének vizsgálatára.
Az aktív enzimnek ez a könnyű azonosítása lehetővé teszi a β-galaktozidáz gén (a lacZ gén) riportergénként történő felhasználását különféle alkalmazásokban.
