Termékek

Az orbitális fibroblasztok érett zsírsejtekké történő differenciálódását, majd a zsírszövet ezt követő felhalmozódását kimutatták a Graves-orbitopathia (GO) progressziójában.Az autofágia részt vesz az adipogenezisben, de keveset tudunk az autofágia szerepéről a GO beindításában és progressziójában.Ennek a tanulmánynak az a célja, hogy megvizsgálja az autofágia szerepét a GO patogenezisében. GO-ban szenvedő betegekből és normál alanyokból származó orbitális zsír-/kötőszövet-explantátumokat, valamint izolált orbitális fibroblasztokat elemeztünk.Az adipogenezist differenciáló tápközeggel indukáltuk hidrogén-peroxiddal vagy anélkül, az autofágiát pedig bafilomycin A1 és Atg5-célzott rövid hajtű RNS (shRNS) segítségével manipuláltuk.Az autofagoszómákat elektronmikroszkóppal azonosították.Az autofágiával kapcsolatos gének expresszióját és az adipogenezishez kapcsolódó transzkripciós faktorokat valós idejű reverz transzkripciós-polimeráz láncreakcióval és/vagy Western blot analízissel elemeztük.A lipidcseppek felhalmozódását Oil Red O festéssel vizsgáltuk. Az autofág vakuolák nagyobb arányban fordultak elő GO sejtekben, mint nem GO sejtekben (p<0,05).Az autofágiával kapcsolatos gének expressziója szignifikánsan magasabb volt a GO szövetekben és sejtekben, mint a nem GO megfelelőikben.Az interleukin-1β növelte az LC3-II, p62 és Atg7 fehérjét a GO sejtekben.Az autofagoszóma felhalmozódást az adipogenezis 4. napján mutatták ki, és a 10. napra csökkent, a lipidcseppek képződésével együtt.Az LC3 és p62 fehérjék expressziója a differenciálódást követő 48 órán belül megnőtt, és a 4. napról a 10. napra fokozatosan csökkent. A bafilomicin A1 kezelés és az Atg5 shRNS általi leütés gátolta a lipidcseppek felhalmozódását és elnyomta az adipogén markerek expresszióját. nem GO szövetek és sejtek, ami arra utal, hogy az autofágia szerepet játszik a GO patogenezisében.Az autofágia manipuláció a GO terápiás célpontja lehet.