ONPG CAS:369-07-3 98,0% Min. fehértől törtfehérig terjedő por
| Katalógus szám | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| termék név | ONPG (2-nitrofenil-béta-D-galaktopiranozid) |
| Molekuláris képlet | C12H15NO8 |
| Molekuláris tömeg | 301,25 |
| Tárolási részletek | 2-8 °C |
| Harmonizált Vámkódex | 29400000 |
Termékleírás
| Tisztaság (HPLC) | Min.98,0% |
| Kinézet | Fehér vagy törtfehér por |
| Megoldás(1% vízben) | Tiszta, színtelen vagy enyhén sárgás oldat |
| Víztartalom(Karl Fisher) | Max.0,5% |
| Fajlagos optikai forgatóképesség [α]D20 (c=1, H2O) | -65,0 °C és -73,0 °C között |
Beszélgetés az ONPG tesztről (β-galaktozidáz teszt)
Az utóbbi időben gyakran felmerülnek a kérdések: 1. Miért használható az ONPG teszt a késleltetett laktóz fermentáció megkülönböztetésére?2. Miért írja elő a nemzeti szabvány, hogy az ONPG teszthez 3%-os nátrium-klorid-triszacharid vas (vagy triszacharid vas) használata szükséges?3. Vibrio parahaemolyticus esetén az OPNG teszt elvégzésekor miért kell a szabvány szerint cseppenként hozzáadni a toluolt?Mi a funkció?
Cégünk sok információt áttekintett, összefoglalt, és az alábbiakban megosztotta Önnel:
Alapelv: Az ONPG kínai neve o-nitrobenzol-β-D-galaktopiranozid.Az ONPG a β-galaktozidáz segítségével galaktózzá és sárga o-nitrofenollá (ONP) hidrolizálható, így a β-galaktozidáz aktivitása a táptalaj színváltozásával kimutatható.
A laktóz egy cukor, amelyet a legtöbb mikroorganizmusnak kimutatnia kell.Anyagcseréjéhez két enzim szükséges, az egyik a sejtpermeáz, a laktóz permeáz hatására jut be a sejtekbe;a másik a β-galaktozidáz, amely a laktózt galaktózzá hidrolizálja.Laktóz és glükóz.A β-galaktozidáz közvetlenül is hathat az ONPG-re, és galaktózzá és sárga o-nitrofenollá (ONP) hidrolizálja.24 óra alatt elkészíthető, akár laktóz késleltetett fermentorokkal is.Ezért magyarázatot ad az 1. tenyészet ferde agarról történő felszedésének és teljes körben 36°C-on 1-3 és 24 órás beoltásának eredményeire.Ha β-galaktozidáz termelődik, 1-3 óra alatt besárgul, ha nincs ilyen enzim, akkor 24 óra alatt nem változtatja meg a színét.
A fenti két enzim szerint a mikroorganizmusok a következő kategóriákba sorolhatók:
1 laktóz fermentáló (18-24 óra) baktérium permeázzal és β-galaktozidáz P + G +;
2 Késleltetett laktóz fermentorok (24 óránál tovább), amelyek nem rendelkeznek permeázással, de tartalmaznak galaktozidázt: P-G+.
3 Nem laktóz fermentorok, amelyekből mind a permeáz, sem a galaktozidáz hiányzik: P-G-.
Az ONPG teszt felhasználható a laktóz-lag-fermentáló baktériumok (P-G+) és a nem fermentáló laktózbaktériumok (PG-) megkülönböztetésére, mint például:
1 Megkülönböztetni a késői laktóz fermentorokat (P-G+) a nem laktózos fermentoroktól (P-G-).
a) Citrobacter (+) és Salmonella arizonae (+) Salmonellából (-).
(b) Escherichia coli (+) a Shigella sonnei-ból (-).
Miért végezték el az ONPG-tesztet egy éjszakán át tartó tenyésztéssel 3%-os nátrium-klorid-vas-triszacharidon (vas-triszacharidon)?Cégünk sok információt megvizsgált, de nincs egyértelmű nyilatkozat.Csak az FDA honlapján olvasható, hogy "Oltja be a tesztelendő tenyészeteket hármas cukor-vas-agar ferde felületekre, és inkubálja 18 órán át 37 °C-on (vagy más megfelelő hőmérsékleten, ha szükséges). Tápanyag (vagy más) ferde agar, amely 1,0-t tartalmaz % laktóz is használható."azt jelenti: a tesztbaktériumokat triszacharid vas táptalajra oltottuk, és 37 °C-on tenyésztettük 18 órán át.Az 1% laktózt tartalmazó ferde táptalaj (vagy más) táptalaj is elfogadható.Ebből arra következtethetünk, hogy a triszacharid vas tápközeg laktózt tartalmaz.Egy éjszakán át tartó növekedés után a baktériumok jó aktív β-galaktozidázt termeltek.Ilyen baktériumok használatával az ONPG gyorsabban lebontható a β-galaktozidáz segítségével.A kísérleti jelenség gyorsabban és jobban megnyilvánul.Ezenkívül a β-galaktozidáz teljes felszabadulása érdekében toluol cseppenkénti hozzáadása és 5 perces vízfürdő szükséges.
