Termékek

Kifejlesztettünk egy új kis interferáló RNS (siRNS) szállító rendszert polietiléniminnel (PEI) és γ-poliglutaminsavval (γ-PGA) alkotott terner komplex felhasználásával, amely csendesítő hatást mutatott, és nem volt citotoxicitás.Az siRNS PEI-vel alkotott bináris komplexei körülbelül 73-102 nm részecskeméretűek és 45-52 mV ζ-potenciálok voltak.Az siRNS/PEI komplexek némító hatása a PEI növekedésével nőtt, a 16-nál nagyobb töltésarányú siRNS/PEI komplexek pedig jelentős luciferáz leütést mutattak egy rendszeresen luciferázt expresszáló egér vastagbél karcinóma sejtvonalban (Colon26/Luc sejtek).Erős citotoxicitást és vér-agglutinációt figyeltek meg azonban az siRNS/Lipofectamine komplexben és az siRNS/PEI16 komplexben.A kationos komplexek anionos vegyülettel való feltöltése ígéretes módszernek bizonyult ezen toxicitások leküzdésére.Ezért 3-as siRNS-komplexeket készítettünk PEI-vel (töltési arány 16) γ-PGA hozzáadásával a citotoxicitás csökkentése és az siRNS szállítása érdekében.Ahogy az várható volt, a terner komplexek citotoxicitása a γ-PGA tartalom növekedésével csökkent, ami csökkentette a komplexek ζ-potenciálját.Az siRNS/Lipofectamine komplexhez hasonló erős hangcsillapító hatást fedeztek fel az anionos felületi töltésű γ-PGA-t tartalmazó terner komplexekben.A terner komplexek nagymértékű beépülését a Colon26/Luc sejtekbe fluoreszcens mikrokópiával igazoltuk.Miután elértük egy exogén transzfektált gén knockdownját, B16-F10 sejtekben megvizsgáltuk a komplex azon képességét, hogy közvetítsen egy endogén háztartási gént, a gliceraldehid-3-foszfát-dehidrogenázt (GAPDH).A hármas komplex (siRNS/PEI16/γ-PGA12 komplex) jelentős GAPDH-leütési hatást mutatott.Így kifejlesztettünk egy hasznos siRNS szállító rendszert.