Termékek

A detergensek hatása a P-glikoprotein atpáz aktivitására: különbségek a bazális és a verapamil-függő aktivitások zavaraiban.

A P-glikoprotein (P-gp), egy plazmamembrán-glikoprotein, amely a multidrug rezisztencia fenotípusához kapcsolódik, és felelős a különböző amfifil gyógyszerek ATP-függő kiáramlásáért.A DC-3F/ADX multirezisztens sejtvonalból előállított membrán vezikulák segítségével vizsgáltuk a különböző detergensek által kiváltott bazális (vagyis gyógyszer hiányában) és verapamil-függő P-gp ATPáz aktivitások perturbációját nem oldódásnál, valamint szolubilizáló koncentrációknál.A növekvő detergens koncentráció mellett a progresszív membrán szolubilizációt fényszórási és centrifugálási kísérletekkel követtük.A nem oldódó detergens koncentrációk esetében a DOC kivételével minden vizsgált detergens a P-gp ATPáz aktivitásának részleges gátlását indukálta, ami nem korrelált a membránokba beépített különböző vizsgált detergensek mennyiségével.A verapamil által kiváltott P-gp aktiváció elemzése azt mutatja, hogy a P-gp ATPáz aktivitását a különböző detergensek eltérően modulálják nem szolubilizáló koncentrációkban.Így a P-gp és a detergensek közötti specifikus kölcsönhatások nagyobb valószínűséggel fordulnak elő, mint a globális membránperturbáció.A különböző vizsgált detergensekkel való szolubilizálást követően az alap P-gp ATPáz aktivitás gyakorlatilag teljesen gátolt, kivéve a CHAPS jelenlétét, amely képes volt megőrizni ezt az aktivitást a natív membránokban mérthez hasonló szinten.A verapamil által kiváltott P-gp ATPáz aktiválás azonban elveszett a P-gp CHAPS általi szolubilizálása során, de a CHAPS kritikus micelláris koncentrációja alá hígítása után helyreállt.Ezek a megfigyelések specifikus kölcsönhatásokat jeleznek a P-gp és a CHAPS molekulák között a kevert micellákon belül.Összességében a P-gp/detergensek specifikus kölcsönhatásait bizonyító adataink összhangban vannak a P-gp transzmembrán doménjein lévő gyógyszerszállító helyek elhelyezkedésével.